ELISA（酶聯免疫吸附測定）作為一種高度敏感和特異的免疫分析技術，其運作基于三項核心原理，這些原理共同確保了檢測的準確性和效率：

1. 固相吸附特性：ELISA技術的第一步涉及到將目標抗原或抗體物理吸附至固相載體表面，通常是聚苯乙烯微孔板。這種吸附并非隨意，而是基于抗原或抗體分子與固相表面間的非共價相互作用，尤其是疏水性相互作用，這一過程保留了分子的免疫活性，使其能特異性識別并結合其對應抗體或抗原。

2. 酶標記的保持活性：接著，抗體或抗原會被共價連接到酶分子上，形成所謂的酶標記物。這個過程對保持酶的催化活性和抗體/抗原的免疫識別能力至關重要。酶標記物能在保持免疫學特性的基礎上，通過其催化活性對底物進行轉化，從而生成可檢測的信號，如顏色變化。

3. 信號量化與分析：當酶標記的抗體或抗原與樣品中的對應抗原或抗體結合后，形成的復合物會在加入特定底物后產生顏色反應。此顏色的深淺與樣品中目標分子的濃度直接相關，即濃度越高，顏色越深。通過比色測定，可以定量分析出樣品中目標抗原或抗體的精確含量，從而實現對特定分析物的定性及定量檢測。

ELISA技術憑借其獨特的優勢，如高靈敏度、特異性強、操作簡便快捷、結果穩定及易于自動化等特點，已被廣泛應用于多個領域的研究與診斷中。它不僅能夠用于多種傳染病、寄生蟲病以及非傳染性疾病標志物的免疫診斷，還能實現大分子和小分子抗原的精確定量，適用于臨床樣本檢測及大規模血清流行病學調查。此外，ELISA的應用范圍還在不斷拓展，涵蓋了細胞內成分的免疫酶定位、抗酶抗體的研究、微量免疫復合物的可視化，以及體液中抗原或抗體的精確定量分析，彰顯了其在生物醫學研究和疾病早期診斷中的重要價值。